Návody a dotazy

Jak probíhá vyhodnocování výsledků protokolem RapidSeq?

Vyhodnocení výsledků získaných protokolem RapidSeq probíhá narozdíl od všech ostatních protokolů Sangerova sekvenování bez zásahu lidské ruky. Každý výsledek je ihned po dokončení elektroforézy v sekvenátoru algoritmicky zpracován a automaticky odesílán klientům.

Dovolujeme si upozornit, že vlastní elektroforetická separace v sekvenátorech může generovat určité chyby, kterým nelze předejít, a které typicky mohou vyžadovat opakování elektroforézy. Současně se může stát, že automatický algoritmus vyhodnotí výsledky neoptimálně, i když elektroforéza proběhne v pořádku. Oba případy mohou vyžadovat zásah našeho operátora, jenž takový vzorek buď podrobí opakované elektroforéze nebo upraví parametry analýzy. K tomuto zásahu operátora ovšem při sekvenaci protokolem RapidSeq nedochází.

Příklady těchto chyb (a neoptimálních výsledků) jsou uvedeny zde.

Četnost výskytu elektroforetických separačních chyb je přibližně asi 1-2% (jeden až dva vzorky ze sta mohou vyžadovat opakování elektroforézy). Četnost výskytu neoptimálního automatického vyhodnocení nelze uvést, protože významně závisí na způsobu přípravy vzorků a jejich charakteru (např. GC obsahu, přítomnosti primerových dimerů apod.).

Opakovanou elektroforézu vzorků analyzovaných protokolem RapidSeq neprovádíme.

Zpět na seznam
© SEQme s.r.o., 2012 - 2024. Všechna práva vyhrazena. Právní upozornění.
webdesign Beneš & Michl