Návody a dotazy

CleanSeq - Jak připravit vzorky

Vzorek je nepřečištěný PCR produkt (alikvot PCR reakce) případně jiný vhodný templát, který lze enzymaticky přečistit. Současně musíte zaslat sekvenační primer(y), nebo zvolit některý z našich univerzálních primerů.

 

Požadavky na primery:

  • Objem primeru: 200 μl na každých 100 vzorků.
  • Koncentrace primeru: 5 μM.
  • Upozorňujeme, že pro sekvenování vzorků dodaných v destičce lze objednat použití max. dvanácti sekvenačních primerů. Při sekvenování vzorků dodaných ve zkumavkách lze objednat použití nejvýše jednoho primeru na každých započatých osm vzorků.

 

Požadavky na vzorky:

Templát

Koncentrace

Celkový objem

PCR produkt <500 bp

~10 ng/μl

5-10 μl

PCR produkt 500–1000 bp

~20 ng/μl

PCR produkt >1000 bp

~40 ng/μl

Plazmid

~100 ng/μl

 

Pozn.: Chcete-li templát sekvenovat obousměrně, stačí zaslat např. pouze jednu destičku s 96 vzorky, každý o objemu 5-10 μl, a k tomu dva sekvenační primery. Objednat ale musíte sekvenaci dvou destiček - 1x protokolem CleanSeq (za použití jednoho z primerů) a 1x protokolem StandardSeq (za použití druhého primeru).

Doporučujeme používat 8-zkumavkové stripy s individuálními víčky (např. Eppendorf 0030124359) nebo 96-jamkové destičky. Nepoužívejte parafilm. Prosíme o jednoduché značení zkumavek nejlépe číslem označujícím pořadí vzorku v objednávce.

Stáhněte si návod v pdf formátu.

Zpět na seznam
© SEQme s.r.o., 2012 - 2024. Všechna práva vyhrazena. Právní upozornění.
Webdesign Vibes Vision